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所有用于免疫组化/免疫细胞化学实验的样本都必须进行固定，以保持组织形态并保留靶分子的抗原性。固定会改变组织的化学成分，通常需要在保持组织结构和保留抗原表位之间做出权衡。细胞或组织固定不完全（固定不足）可能导致组织内靶蛋白快速蛋白水解降解，从而降低特异性免疫反应性。

表位被掩盖的原因可能是表位内氨基酸的交联、表位附近或位点无关肽段的交联、表位构象的改变或抗原静电荷的改变。抗原修复是指任何能够逆转表位掩盖并恢复表位-抗体结合的技术。

1、研究中该如何选择 AAV 血清型和剂量？ 您可以在我们的血清型选择指南中找到所有血清型和组织趋向性的介绍。2、重组 AAV 是复制缺陷的吗？对于野生型 AAV，如果没有辅助病毒（如腺病毒）的存在，其复制效率极低。对于现在生产的重组 AAV，复制和衣壳基因是在 Rep/Cap 质粒中提供的。只有 AAV 基因组的两个 ITR（倒置末端重复序列）被保留并包装成病毒颗粒，而所需的腺病毒基因要么是由腺病毒提供的，要么是由另一个质粒提供的。理论上，重组 AAV 是不可能复制的。3、AAV 病毒载体表达目的基因效果差，可能是什么原因？可能的原因解决方案AAV 血清型靶向特异性不足测试不同的 AAV 血清型对靶标组织/细胞的特异性；通过基因工程修饰 AAV 的衣壳蛋白，改进 AAV 的靶向性病毒量不够做预实验进行最佳感染剂量探索，确保使用适量的病毒启动子选择不当，目的基因表达量低优化启动子选择，根据目标细胞类型选择合适的启动子mRNA 翻译效率低增加 IRES 或其他元件来增强翻译效率；调整目的基因的序列以优化其 mRNA 结构，增加翻译效率 4、AAV（带荧光标记）体内感染后检测不到荧光或者荧

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