蛋白标签

可能有如下几方面的问题蛋白质表达水平过低：如果蛋白质的表达水平很低，那么Flag标签就可能很难被检测到。

1.Flag抗体效仿不足：Flag抗体可能不够敏感，导致Flag标签没有被检测到。

2.Flag标签不稳定：Flag标签在表达和纯化过程中可能不稳定，导致在Western blot实验中没有被检测到。

3.Western blot技术问题：有可能是技术问题，例如抗体稀释比例不合适，板材过于热或者环境条件不稳定等。

可以增加上样量后再检测，可能是样本量太小。

有几个因素可能导致Flag标签没有被检测到：

表达量过低：如果构建的质粒表达量很低，那么Flag标签可能难以测到。

蛋白的不完整性：如果Flag标签的表达蛋白不完整，那么它可能难以被检测到。

标签位置不对：如果Flag标签的位置不在蛋白的正确位置，可能难以检测到。

抗体效仿不佳：如果Flag标签抗体的效仿不佳，那么Flag标签可能难以检测到。

组织存在问题：如果蛋白的表达存在组织特异性，那么Flag标签可能在一些组织中难以被检测到。

建议您考虑这些因素，并进一步验证质粒的表达和蛋白的完整性，以确定问题的具体原因。